Coltura del batterio in rapida crescita Vibrio natriegens

Prendi una provetta contenente una coltura di Vibrio natriegens, un batterio a crescita rapida.

Centrifugare la coltura per pellettare i batteri. Eliminare il surnatante contenente il terreno residuo.

Risospendere il pellet batterico in un terreno fresco e trasferirlo in un pallone conico contenente lo stesso terreno per la preparazione della coltura batterica.

Incubare la coltura con agitazione in condizioni aerate.

A causa di un breve tempo di generazione, Vibrio natriegens utilizza i nutrienti e si divide rapidamente per generare una popolazione batterica concentrata.

Utilizzando uno spettrofotometro, monitorare regolarmente la densità ottica (OD) per determinare la concentrazione batterica.

Far crescere la coltura fino a quando l'OD raggiunge circa uno, indicando una fase di crescita esponenziale con un'elevata attività metabolica.

Trasferire la coltura in provette da centrifuga.

Centrifugare a bassa temperatura per separare i batteri preservando l'integrità cellulare.

Posizionare il tubo sul ghiaccio e rimuovere il surnatante contenente detriti cellulari.

Conservare il pellet batterico a temperatura ultrabassa per l'analisi a valle.

Per iniziare, lavare un millilitro della coltura di Vib