Preparazione di una coltura anaerobica di fanghi in condizioni prive di ossigeno

Iniziare con un pallone contenente acqua distillata.

Far bollire l'acqua per rimuovere l'ossigeno disciolto, riducendo al minimo l'ossigeno residuo che può inibire la crescita anaerobica.

Raffreddare l'acqua mentre si sciacqua continuamente con azoto per evitare il riassorbimento dell'ossigeno.

Posizionare il pallone su una bilancia e aggiungere una quantità fissa di fango del digestore anaerobico.

I fanghi contengono vari tipi di microbi anaerobi e materiale organico residuo.

Aggiungere azoto e sigillare immediatamente il pallone con un setto di gomma per mantenere le condizioni anaerobiche.

Incubare con agitazione per disperdere uniformemente i batteri anaerobi e stimolare il metabolismo migliorando il contatto con la materia organica nei fanghi.

L'ambiente privo di ossigeno consente agli anaerobi obbligati di proliferare prevenendo il danno metabolico indotto dallo stress ossidativo.

Dopo l'incubazione, lasciare che le particelle di fango più grandi si depositino.

Successivamente, utilizzando una siringa, prelevare l'inoculo anaerobico.

Trasferire l'inoculo in un pallone di siero contenente un terreno di crescita privo di ossigeno per promuovere la sopravvivenza batterica anaerobica.

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