Name: Corsa di modellazione in Mouse - Medio occlusione dellarteria cerebrale con il Modello Filament (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-01-06T17:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 28 s
Description: Impara la tecnica di occlusione dell'arteria cerebrale media con filamento in mouse per modellare l'ischemia focale. Questo metodo riproducibile consente di studiare i deficit neurologici e la morte neuronale in modelli di ictus.

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Questo lavoro è stato finanziato dal Settimo programma quadro della Comunità europea (FP7/2007-2013) in convenzione di sovvenzione n ° 201024 en ° 202213 (Rete europea Stroke). Ulteriori finanziamenti è stato dato dal Bundesministerium für Bildung und Forschung (Center for Stroke Research Berlino), e la Deutsche Forschungsgemeinschaft (Exzellenzcluster NEUROCURE). Gli autori desiderano ringraziare Mareike Thielke (Dip. di Neurologia Sperimentale, Charité di Berlino) per il sostegno durante l&#39;operazione e Elke Ludwig (Charité Video Services) per produrre l&#39;animazione.

Di garantire alta qualità e riproducibilità, si consiglia l'uso di Procedure Operative Standard (SOP). In questo video, pubblicato SOP sviluppati e utilizzati nel nostro laboratorio vengono applicate 1. 1. Medio occlusione dell'arteria cerebrale <ol><li> I topi vengono anestetizzati con un adeguato regime anestetico a consultarsi con il personale veterinario. (Induzione Per esempio con 1,5 - 2% isoflurano e manutenzione con 1,0 - 1,5% isoflurano in 2 / 3 N2O e 1 / 3 O2 utilizzando un vaporizzatore). <ol><li> La temperatura corporea dei topi è mantenuta a 36,5 ° C ± 0,5 ° C durante l'intervento con una piastra di riscaldamento. Una controllata pad riscaldamento feedback, che riscalda in base alla temperatura rettale del mouse, è altamente raccomandato. </li><li> Disinfettare la cute e del pelo circostante con un agente appropriato (per esempio alcool etilico 70%) e asciugare successivamente. </li></ol></li><li> Una incisione del collo linea mediana è fatto e dei tessuti molli sono separati. </li><li> La sinistra arteria carotide comune (LCCA) è attentamente sezionato libero dai nervi circostanti (senza danneggiare il nervo vagale) e una legatura è fatta utilizzando 6.0/7.0 stringa. Stringa 5.0 può anche essere usato. </li><li> La sinistra carotide esterna (LECA) è quindi separato ed un secondo nodo è fatto. </li><li> Successivamente, la carotide interna sinistra (LICA) è isolato e un nodo viene preparato con un filamento 6.0. </li><li> Dopo aver ottenuto buona vista della carotide interna sinistra (LICA) e l'arteria sinistra pterigopalatina (LPA), entrambe le arterie vengono ritagliate, con una clip microvascolare. </li><li> Un piccolo foro è tagliata nella LCCA prima che si biforca a LECA e la LICA. Un monofilo in nylon 8,0 rivestito con miscela indurente silicio (vedi sotto) viene introdotto nel LICA, fino a toccare il clip. L'attenzione deve essere pagato non entrare l'arteria occipitale. (Figura 1) </li><li> Le arterie tagliate sono aperti, mentre il filamento è inserito nella LICA per occludere l'origine della LMCA nel circolo di Willis. </li><li> Il terzo nodo sulla LICA è chiuso per riparare il filamento in posizione. </li><li> I topi ricevere 0,5 ml di soluzione fisiologica per via sottocutanea come riempimento del volume. Per alleviare il dolore, lidocaina gel topico nella ferita. </li><li> Se la riperfusione è destinato, topi soggiornare per 30-90 occlusione min in una gabbia riscaldata, la ferita potrebbe essere chiuso con una piccola clip di sutura. In seguito, una seconda anestesia viene eseguita, il nodo terzo sulla ICA è momentanea aperto e il filamento ritirata. </li><li> Le suture rimanenti sono accorciati e la pelle è adattata con una sutura chirurgica. </li><li> Tutti gli animali ricevono un rifornimento secondo volume come sopra descritto. </li><li> Gli animali vengono messi in una gabbia riscaldata per due ore per controllare la temperatura corporea. <ol><li> Gli animali devono essere controllate ogni giorno dopo l'intervento per i segni di disagio. I topi potrebbero mostrare una certa perdita di peso dopo chirurgia. Essi ricevono cibo purè in un piatto di Petri-posta al piano per incoraggiare un'alimentazione. Il cibo è sostituito al giorno per sette giorni. </li></ol></li></ol> 2. Operazione Sham <ol><li> Per le operazioni di finzione il filamento si inserisce per occludere LMCA e ritirati immediatamente per consentire riperfusione istantaneo (1,8). L'operazione successiva è identica a quella effettuata sugli animali sottoposti a ischemia cerebrale (1,9-1,14), tra cui una seconda anestesia. </li></ol> 3. Preparazione del filamento <ol><li> Sterilità del filamento deve essere considerato. L'utilizzo di attrezzature sterilizzate e una gestione appropriata del filamento è poi un prerequisito per un intervento chirurgico sterile. Disinfezione del filamento è difficile, dal momento che molti dei metodi di sterilizzazione comune può peggiorare la qualità del filamento. Tuttavia i metodi come le radiazioni, per esempio con raggi UV o raggi γ, o sterilizzazione chimica, per esempio con gas altamente reattivi come l'ossido di etilene, sono applicabili. </li><li> 8,0 filamenti di nylon è tagliato in lunghezza di 11 mm sotto il microscopio </li><li> La punta filamento deve essere rivestito completamente e in modo uniforme su una lunghezza di 8 mm con una miscela indurente di Xantopren M mucosa ed attivatore NF Optosil </li></ol> 4. Rappresentante Risultati A seconda della durata della limitazione del flusso sanguigno, motori e comportamentali differenti risultato deficit. Sia dopo 30 e 60 min di ischemia cerebrale, gli animali in molti casi mostrano resistenza ridotta a spinta laterale e girando a causa di disturbi nella locomozione. Manifestano lievi lesioni come posizione flessori nella parte anteriore limbs. Questi segni facilmente osservabile può essere utilizzato come un punteggio di base per il successo dell'operazione 2. Morfologicamente la lesione può essere valutata utilizzando istologia o risonanza magnetica (MRI). Sessanta minuti di occlusione dell'arteria cerebrale media produce pannecrosis tessuto in una zona che comprende sia il corpo striato e la neocorteccia, mentre 30 minuti di ischemia causa la morte delle cellule neuronali principalmente limitato a corpo striato. 3 (Figura 2) In termini di volume dell'infarto, ci aspettiamo una deviazione standard inferiore al 30% in una serie di operazioni. La mortalità dipende dal tempo di occlusione con circa il 5% dopo 30 min di ischemia e 10 - 20% dopo 60 min. Un'altra possibilità minima invasività è l'uso di flussimetria laser Doppler (LDF) durante l'operazione, che consente un controllo diretto del suo successo. In un singolo animale, la riduzione a 10 - 20% dei valori preocclusion indica chiaramente l'induzione di successo di focale ischemia cerebrale 4 Tuttavia, LDF non può essere usato come metodo di confronto interindividuale, dal momento che LDF può solo misurare i cambiamenti quantitativi (in percentuale) di sangue. flusso all'interno di un volume del tessuto di piccole e limitate campione. Non dà informazioni sulla portata spaziale della riduzione del flusso sanguigno 5. Ci sono diversi test per valutare gli aspetti comportamentali dopo l'ictus, tra cui l'analisi dell'andatura 6,7, rotarod 8, Polo di test 9,10, test di rimozione adesivo 11,12, test scala 13,14, gradino prova scaletta 15,16 e il labirinto ad acqua di Morris 17. In tutti questi test, i topi sottoposti a MCAo eseguire meno successo rispetto agli animali di controllo. <img src="/files/ftp_upload/2423/2423fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1. Schema dell'architettura nave che irrorano il cervello (raffigurato in background) nel topo. Ceppi diversi può mostrare variazioni, ad esempio, l'arteria occipitale lascia a volte da l'arteria carotide interna. <img src="/files/ftp_upload/2423/2423fig2.jpg" alt="Figura 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2. Illustrazione schematica di dimensioni lesione tipica dopo diversi momenti di riperfusione nel modello prossimale MCAo. Nel mezzo, il corso tipico di attività funzionale e flusso ematico cerebrale dopo MCAo sono raffigurati. (MCAo: occlusione dell'arteria cerebrale media, LDF: misura laser Doppler)

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<li>Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bench+to+bedside%3A+the+quest+for+quality+in+experimental+stroke+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Bench to bedside: the quest for quality in experimental stroke research.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 26, 1465-1478 (2006).</li>
<li>Macleod, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Good+laboratory+practice%3A+preventing+introduction+of+bias+at+the+bench%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Good laboratory practice: preventing introduction of bias at the bench.</a> Stroke. 40, 50-52 (2009).</li>
<li>Group, S. T. A. I. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+standards+regarding+preclinical+neuroprotective+and+restorative+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Recommendations for standards regarding preclinical neuroprotective and restorative drug development.</a> Stroke. 30, 2752-2758 (1999).</li>
</ol>

Gli esperimenti sugli animali sono stati eseguiti in conformità con le linee guida e dei regolamenti previsti dal Landesamt fuer Gesundheit und Soziales, Berlino, Germania.

Il modello di transitorio, MCA occlusione prossimale 18,19 imita presentati qui uno dei più comuni tipi di ictus ischemico nei pazienti. 20 Sulla base di tempi di riperfusione variabile, il modello offre vari gradi di danni che vanno da attacco ischemico transitorio (TIA) a grandi infarti, compresi i pezzi più importanti dell&#39;emisfero ischemico. Questo consente al ricercatore di studio diversi meccanismi fisiopatologici dopo l&#39;ictus. 20,21 Intervento può essere eseguito in un breve periodo di tempo e produce lesioni altamente riproducibili. Tuttavia, questo richiede un controllo accurato dei fattori di confondimento. 22 piccole differenze nella tecnica di funzionamento può spiegare effetti diversi sulla infarto. 23,24, inoltre, a causa di variazioni in anatomia vascolare cerebrale, diversi ceppi di topi mostrano un risultato diverso. 25,26 Corpo temperatura influisce danni neurologici, con ipotermia porta a lesioni più piccole 27 e ipertermia più gravi deficit. 28 Di conseguenza, il controllo della temperatura e la manutenzione è molto importante in questo modello. 29 Inoltre, la pressione sanguigna e dei gas del sangue sono importanti fattori di confondimento dei risultati e la necessità di essere monitorato. 30,31 L&#39;uso di metodi invasivi e veloce minima (misurazione non invasiva della pressione sanguigna, adatte e facilmente accessibili i siti di raccolta del sangue) è raccomandato. La scelta della anestesia è anche molto importante, in quanto alcuni possono avere degli effetti neuroprotettivi, e / o vasodilatatori, come ad esempio isoflurano. 32 Di conseguenza, l&#39;esposizione ad anestesia deve essere il più breve possibile e standardizzati. Escludiamo animali che hanno subito un intervento chirurgico per più di 15 min. Rasatura del sito chirurgico produce microabrasions e l&#39;infiammazione e rilascia frammenti di capelli. Questo potrebbe ulteriormente aumentare l&#39;infiammazione e favorire infezioni locali, che potrebbero ripercuotersi sulla fisiopatologia ictus. Condizioni abitative, in particolare l&#39;uso di arricchimento, può influire sull&#39;esito ictus e devono essere standardizzati e descritti in rapporti di ricerca. 6,33,34 L&#39;uso di arricchimento ambientale e il suo effetto sulla riproducibilità è una questione di discussione. 35 Un altro fattore confondente importante è il Corsa rischio indotto di infezione soprattutto dopo lunghi periodi di ischemia 36, che conduce alla morbilità supplementare e un aumento della mortalità. 37,38 Come diventare infezioni sintomatiche al giorno verso le 3 a 5, questo ha conseguenze importanti per un lungo periodo di follow-up in tali modelli. Per produrre risultati rilevanti per lo sviluppo di nuove strategie terapeutiche per l&#39;ictus, normazione e controllo qualità è molto importante in studi preclinici ricerca traslazionale corsa 39 &quot;Good Laboratory Practice&quot; 40,41 mandati.: <ol><li> una descrizione appropriata e dettagliata degli animali utilizzati; </li><li> calcolo della dimensione del campione e la segnalazione delle dimensioni effetto atteso; </li><li> criteri di inclusione ed esclusione, impostare prima dello studio; </li><li> randomizzazione della ripartizione in gruppi; </li><li> occultamento di allocazione relativamente agli investigatori; </li><li> segnalazione animali esclusi dall&#39;analisi; </li><li> valutazione in cieco degli esiti; </li><li> segnalazione di potenziali conflitti di interesse e fondi di studio. </li></ol>

<table><tbody><tr><td>Forbici chirurgiche (per taglio della cute)</td><td>Fine Science Tools</td><td>14028-10</td><td></td></tr><tr><td>2 Pinze di Dumont (punta dritta Medical #5)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-20</td><td></td></tr><tr><td>Forbici a molla (secondo Vannas)</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-00</td><td></td></tr><tr><td>Pinza applicatrice per microclips</td><td>Fine Science Tools</td><td>00072-14</td><td></td></tr><tr><td>Microclamp vascolare (ad es. S&amp;amp;G B1-V)</td><td>Fine Science Tools</td><td>00396-01</td><td>Alternativamente possibile utilizzare Serrefine</td></tr><tr><td>2 Emostatici secondo Hartmann</td><td>Fine Science Tools</td><td>13002-10</td><td></td></tr><tr><td>Pinza portaago (secondo Olsen-Hegar o simile)</td><td>Fine Science Tools</td><td>12002-14</td><td></td></tr><tr><td>Pinze anatomiche standard (per chiusura della ferita)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11000-12</td><td></td></tr><tr><td>Filetti 5/0</td><td>Suprama</td><td></td><td>per legature vascolari</td></tr><tr><td>Filetti 6/0</td><td>Suprama</td><td></td><td>per sutura della cute, possibile anche 5/0</td></tr><tr><td>Lidocaina (ad es. Xylocain Gel 2%)</td><td>AstraZeneca</td><td></td><td>oppure altro analgesico locale</td></tr><tr><td>Microscopio dissecatore (microscopio stereoscopico), ingrandimento da 6x a max 40x</td><td>Leica Zeiss</td><td>MZ6 Stemi2000C</td><td></td></tr><tr><td>Sorgente luminosa fredda</td><td>Leica Microsystems</td><td>KL1500</td><td></td></tr><tr><td>Sistema di riscaldamento con controllo termico a retroazione</td><td>Fine Science Tools</td><td>21052-00</td><td>Comprende tappetino per topo e sonda piccola</td></tr><tr><td>Sistema di anestesia per isoflurano</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Abott</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Camera di recupero veterinaria</td><td>Peco Services</td><td>V1200</td><td>Gabbia riscaldata</td></tr><tr><td>Filetto in nylon 8.0</td><td>Suprama</td><td>TEL181005</td><td>per rivestimento</td></tr><tr><td>Bisturi</td><td></td><td></td><td>Per tagliare il filetto in pezzi</td></tr><tr><td>Righello</td><td></td><td></td><td>Per tagliare il filetto alla lunghezza corretta</td></tr><tr><td>Xantopren M Mucosa</td><td>Heraeus Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Attivatore Universal Plus</td><td>Heraeus Instruments</td><td></td><td>Optosil - Xantopren</td></tr><tr><td>2 Pinze di Dumont (punta dritta Medical #5)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-20</td><td></td></tr><tr><td>Supporto morbido per conservare e afferrare i filamenti non rivestiti</td><td></td><td></td><td>ad es. garze, schiuma, &amp;#8230;</td></tr><tr><td>Contenitore per filamenti appena preparati</td><td></td><td></td><td>ad es. piastra di Petri, schiuma flessibile, &amp;#8230;</td></tr></tbody></table>

corsa di modellazione in mouse - medio occlusione dell&#39;arteria cerebrale con il modello filament

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

L&#39;ictus è tra le più frequenti cause di morte e disabilità adulta, soprattutto nei paesi altamente sviluppati. Tuttavia, le opzioni di trattamento fino ad oggi sono molto limitate. Per soddisfare la necessità di nuovi approcci terapeutici, la ricerca sperimentale corsa impiega spesso modelli di roditori di ischemia cerebrale focale. La maggior parte dei ricercatori utilizzano occlusione permanente o transitoria dell&#39;arteria cerebrale media (MCA) in topi o ratti. Occlusione prossimale dell&#39;arteria cerebrale media (MCA) attraverso la tecnica di sutura intraluminale (il cosiddetto filo di sutura o modello) è probabilmente il modello più frequentemente utilizzati nella ricerca sperimentale ictus. Il modello intraluminale MCAO offre il vantaggio di indurre riproducibile ischemia transitoria o permanente del territorio MCA in maniera relativamente non invasiva. Approcci intraluminale interrompere il flusso di sangue di tutto il territorio di questa arteria. Filamento occlusione così gli arresti di flusso prossimale al lenticolo-striata arterie, che forniscono i gangli della base. Filamento occlusione dei risultati MCA nelle lesioni riproducibile nella corteccia e nello striato e può essere permanente o transitoria. Al contrario, i modelli inducono distale (per la ramificazione della lenticolo-striata arterie) MCA occlusione tipicamente striato di ricambio e soprattutto coinvolgere la neocorteccia. Inoltre questi modelli hanno bisogno di craniectomia. Nel modello ha dimostrato in questo articolo, un filamento di silicio ricoperto viene introdotto in arteria carotide comune e avanzate lungo l&#39;arteria carotide interna nel circolo di Willis, dove blocca l&#39;origine dell&#39;arteria cerebrale media. Nei pazienti, occlusioni dell&#39;arteria cerebrale media sono tra le cause più comuni di ictus ischemico. Dal momento che diversi intervalli ischemico possono essere scelti liberamente in questo modello a seconda del punto di tempo di riperfusione, lesioni ischemiche con vari gradi di gravità può essere prodotta. Riperfusione con la rimozione del filamento occlusione, almeno in parte i modelli il ripristino del flusso sanguigno dopo spontanei o terapeutici (tPA) lisi di un coagulo tromboembolici negli esseri umani. In questo video vi presentiamo la tecnica di base così come le insidie ​​maggiori e fattori di confondimento che possono limitare il valore predittivo di questo modello.

Occlusione filamentosa dell&#39;arteria cerebrale media è un modello comune per lo studio di ictus ischemico nei topi.

Corsa di modellazione in Mouse - Medio occlusione dell&#39;arteria cerebrale con il Modello Filament

L'ictus è tra le cause più frequenti di morte e di disabilità nell'adulto, specialmente nei paesi altamente sviluppati. Tuttavia, le opzioni terapeutiche disponibili ad oggi sono...

L'obiettivo generale di questa procedura è produrre un modello murino di ischemia cerebrale focale bloccando l'arteria cerebrale media mediante un filamento intraluminale. Ciò viene ottenuto praticando un'incisione mediana nel collo ed esponendo l'arteria carotide comune. Il passaggio successivo consiste nel posizionare dei legami intorno all'arteria carotide comune e utilizzare delle pinze sull'arteria carotide esterna per mantenerle in posizione e prevenire il sanguinamento.L'ultimo passaggio della procedura consiste nell'introdurre il filamento nel circolo di Willis. Questo blocca il ramo dell'arteria cerebrale media, provocando, in definitiva, deficit neurologici. Di conseguenza, l'occlusione può essere identificata osservando i cambiamenti nel comportamento.Uno dei principali vantaggi dell'occlusione prossimale dell'arteria cerebrale media mediante la tecnica del filamento è che consente lesioni altamente riproducibili nello strato e nella corteccia. L'ischemia può essere indotta in modo permanente o transitorio; inoltre, poiché non richiede una craniectomia filamentosa, l'occlusione dell'arteria cerebrale media può considerarsi più o meno non invasiva. Generalmente, i soggetti alle prime esperienze con questo metodo incontrano difficoltà a causa della natura delicata delle tecniche microchirurgiche. Prima della procedura, preparare il filamento tagliando un filamento di nylon 8.0 in segmenti lunghi 11 millimetri al microscopio.La punta del filamento deve essere ricoperta completamente e uniformemente, per una lunghezza di otto millimetri, con una miscela di silicio; si raccomanda l'uso di procedure operative standard per ottenere risultati ottimali. Il tipo di topo utilizzato dipende dall'obiettivo dello studio. In generale, i topi dovrebbero avere un'età superiore a 10 settimane.Utilizzare agenti anestetici appropriati in consultazione con il personale veterinario. Durante l'intervento chirurgico, mantenere la temperatura corporea dei topi a circa 36,5 gradi Celsius mediante una piastra riscaldante; preparare il sito chirurgico, disinfettare la pelle e il pelo circostante e lasciare asciugare. Praticare un'incisione mediana lungo il collo e allontanare delicatamente i tessuti molli.L'arteria carotide comune sinistra viene accuratamente dissezionata, liberandola dai nervi circostanti senza danneggiare il nervo vago, e viene praticato un legame utilizzando un filo di sutura da 5,0 a 7,0. Successivamente, isolare l'arteria carotide esterna sinistra ed effettuare un secondo nodo. Dopo aver isolato l'arteria carotide interna sinistra, annodarla in modo lento.Utilizzando un filamento da 6,0, il nodo verrà stretto successivamente nel corso della procedura. Dopo aver ottenuto una buona visualizzazione dell'arteria carotide interna sinistra e dell'arteria tegoplatina sinistra, entrambe le arterie vengono clampate esternamente per prepararle all'inserimento del filamento. Viene praticato un piccolo foro nell'arteria carotide comune prima della sua biforcazione.Il monofilamento preparato in precedenza viene quindi introdotto nell'arteria. Le arterie legate vengono aperte mentre il filamento viene inserito nell'arteria carotide interna. Per occludere l'arteria cerebrale media, il terzo nodo sull'arteria carotide interna viene chiuso.Per fissare il filamento in posizione, applicare quindi del gel di lidocaina topicamente sulla ferita per alleviare il dolore. Per gli interventi fittizi, il filamento viene inserito ed estratto immediatamente per consentire una rapida ripristino della perfusione ed viene somministrato 0,5 millilitri di soluzione salina per via sottocutanea come reintegro volumetrico. Per studiare gli effetti della riprperfusione, aprire il terzo nodo ed estrarre il filamento.Un periodo di tempo stabilito dopo l'ischemia, solitamente dopo 30-60 minuti. In questo esempio, dopo 60 minuti dall'occlusione, consentire la riperfusione ed eseguire una seconda iniezione di reintegrazione volumetrica con soluzione salina. Infine, accorciare i punti restanti e chiudere la cute con un punto chirurgico.Posizionare gli animali in una gabbia riscaldata per due ore per favorire il recupero dopo l'intervento chirurgico; controllare gli animali quotidianamente per rilevare segni di disagio. Dopo l'intervento, potrebbe verificarsi una perdita di peso, e ai topi dovrebbe essere fornito cibo tritato disposto in una piastra di Petri sul fondo della gabbia. Per incoraggiare l'alimentazione.Il cibo viene sostituito quotidianamente per sette giorni. La durata della restrizione del flusso sanguigno può provocare differenze nei deficit motori e comportamentali. Dopo 30 o 60 minuti di ischemia cerebrale, la maggior parte degli animali mostra una ridotta resistenza.Un successivo spostamento laterale e movimenti circolari dovuti a un disturbo della locomozione, lesioni più lievi si manifestano con una posizione flessoria degli arti anteriori. Questi segni facilmente osservabili possono essere utilizzati come punteggio di base per valutare il successo dell'intervento. La lesione risultante può essere valutata mediante istologia o risonanza magnetica.Come mostrato qui, un'occlusione di 60 minuti dell'arteria cerebrale media provoca una pan-necrosi del tessuto in una zona che comprende sia il corpo striato che la corteccia, mentre 30 minuti di ischemia causano principalmente la morte cellulare neuronale, limitata al corpo striato. Chirurghi esperti nella MCAO possono padroneggiare questa tecnica in 10 minuti. Durante il tentativo di eseguire questa procedura, è importante ricordare di seguire le procedure operative standard per garantire risultati riproducibili e controllare i fattori di confondimento.

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Dimostriamo nel video un metodo per produrre una occlusione dell'arteria cerebrale media in topi adulti utilizzando un monofilamento intraluminale. Mostriamo anche come valutare il grado di infarto cerebrale da 2,3,5-trifeniltetrazolio cloruro (TTC) colorazione.

Modello murino di Mezzo occlusione dell&#39;arteria cerebrale

Il intraluminale occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAO) modello è il modello più frequente tra i modelli sperimentali utilizzati ictus ischemico. Qui dimostrerà tutto il modello in dettaglio con la guida di flussimetria laser Doppler, ed i suoi risultati rappresentativi.

Intraluminali occlusione dell&#39;arteria cerebrale media (MCAO) Modello per l&#39;ictus ischemico con la guida flussimetria laser Doppler in topi

Questo video descrive la procedura per sviluppare l'ictus transitorio in un modello murino utilizzando l'occlusione basata su filamenti rivestiti di silicone dell'arteria cerebrale media. Il modello sviluppato imita l'ictus umano, aiutando così a studiare nuove strategie terapeutiche per il trattamento dell'ictus.

Modello di ictus transitorio basato sull'inserimento di filamenti: una procedura chirurgica per eseguire l'occlusione dell'arteria cerebrale media nel cervello murino

Vari modelli murini di occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAO) sono ampiamente utilizzati nella ricerca sul cervello sperimentale. Qui, dimostriamo il modello di transcranica permanente distale MCAO che produce coerente infarto corticale di misura corrispondente al danno imposto dalla maggioranza degli ictus ischemici umani.

Corsa di modellazione in Mouse: Coagulazione permanente dell&#39;arteria cerebrale media distale

Per comprendere la fisiopatologia di ictus, è importante utilizzare modelli affidabili. Questo documento descrive uno dei modelli di ictus più frequentemente utilizzati nei topi, chiamato il modello cerebrale media occlusione dell'arteria (MCAO) (anche chiamato il filamento intraluminale o modello di sutura) con riperfusione.

Approccio chirurgico per occlusione dell&#39;arteria cerebrale media e riperfusione indotta ictus nei topi

L'ictus è un problema globale con opzioni di trattamento minime e nessuna terapia clinica attuale per rigenerare il tessuto cerebrale perso. Qui descriviamo i metodi per creare un preciso colpo fototrombotico nella corteccia motoria dei roditori e la successiva iniezione di biomateriali idrogel per studiare i loro effetti sulla rigenerazione dei tessuti dopo l'ictus.

Iniezione di scaffold di idrogel Biomateriale al cervello dopo l'ictus

Diversi modelli di occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAo) sono utilizzati nella ricerca sperimentale sull'ictus. Qui, viene descritto un modello sperimentale di ictus di MCAo transitorio attraverso l'arteria carotide esterna (ECA), che mira a imitare l'ictus umano, in cui il trombo cerebrovascolare viene rimosso a causa della lisi spontanea del coagulo o della terapia.

Modellazione dell'ictus nei topi: occlusione transitoria dell'arteria cerebrale media attraverso l'arteria carotide esterna

Questo protocollo dimostra un modello unico di ictus del topo con un infarto di medie dimensioni e un eccellente tasso di sopravvivenza. Questo modello consente ai ricercatori preclinici sull'ictus di estendere la durata dell'ischemia, utilizzare topi anziani e valutare gli esiti funzionali a lungo termine.

Un modello modificato di occlusione dell'arteria cerebrale media transcranica per studiare gli esiti dell'ictus nei topi anziani

Questo protocollo descrive il modello di ischemia cerebrale focale transitoria nei topi attraverso l'occlusione intraluminale dell'arteria cerebrale media. Inoltre, vengono mostrati esempi di valutazione dei risultati utilizzando la risonanza magnetica per immagini e test comportamentali.

Modello transitorio di occlusione dell'arteria cerebrale media dell'ictus

Questo protocollo descrive il processo di preparazione alla riperfusione dell'occlusione dell'arteria cerebrale media attraverso l'arteria carotide comune.

Una preparazione del modello modificata per la riperfusione dell'occlusione dell'arteria cerebrale media

Impara la tecnica di occlusione dell'arteria cerebrale media con filamento in mouse per modellare l'ischemia focale. Questo metodo riproducibile consente di studiare i deficit neurologici e la morte neuronale in modelli di ictus.

Corsa di modellazione in Mouse - Medio occlusione dell'arteria cerebrale con il Modello Filament

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