Test fluorescente ad alta produttività per studiare le interazioni microbio-vermi

Inizia con un tubo contenente vermi C. elegans .

Trasferire i vermi su una piastra multipozzo con un mezzo di agarosio ricco di nutrienti contenente sia i batteri di controllo che quelli di test.

Durante l'incubazione, i vermi ingeriscono batteri, che colonizzano l'epitelio intestinale e rilasciano amminoacidi che fungono da fonte di nutrienti. Questi amminoacidi vengono metabolizzati in derivati amminoacidi e immagazzinati in granuli intestinali correlati ai losomi.

Successivamente, aggiungi un nuovo tampone e trasferisci i vermi su una piastra nera multipozzo per il saggio.

Aggiungi un induttore chimico di stress a ogni pozzo e sigilla la piastra di sicurezza.

Metti la piastra in un lettore di lastre a fluorescenza e registra la fluorescenza.

Nei vermi, l'induttore dello stress provoca stress ossidativo, che danneggia le cellule epiteliali intestinali.

Questo provoca la rottura dei granuli intestinali correlati ai losomi, rilasciando derivati amminoacidici che, esposti alla luce ultravioletta, fluoresce blu.

Confrontare la fluorescenza dei vermi esposti al batterio di controllo e testare per valutare l'efficienza della colonizzazione batterica e il loro impatto sulla risposta allo stress