JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 2:08 min. • November 28th, 2025
Inizia con un stock congelato di batteri.
Usa un anello di inoculazione sterile per far stendere i batteri congelati su una piastra di agar nutriente. Incubare la piastra rovesciata per evitare la condensazione dell'acqua sulla superficie dell'agar.
I batteri utilizzano i nutrienti, crescono sulla superficie dell'agar e formano colonie visibili distinte.
Seleziona una singola colonia e inoculala in un mezzo liquido contenente nutrienti per iniziare una coltura pura.
Incubare il tubo in condizioni di agitazione vigorosa.
Scuotere mantiene l'aerazione nel tubo e mantiene le cellule sospese, impedendo loro di depositarsi sul fondo.
Garantisce inoltre una distribuzione uniforme dei nutrienti in tutto il mezzo, favorendo una crescita batterica esponenziale.
Questo porta a una sospensione batterica densa e metabolicamente attiva.
La coltura batterica nel mezzo liquido è ora pronta per ulteriori esperimenti.
Per utilizzare il calcio, con un anello inoculante sterile, rimuovere una piccola quantità di brodo congelato e striare i batteri per ottenere colonie singole su piastre di agar LB.
Incubare le piastre con il cofaccio rivolto verso il basso per 12-16 ore a 37 gradi Celsius. Procurati un piatto già preparato. Inoculare 4 millilitri di brodo LB liquido in un tubo sterile da 10 millilitri con una singola colonia, toccando la superficie della singola colonia con un anello sterilizzato e trasferendo la colonia nel brodo liquido. Poi, incubare la coltura con aerazione in un incubatore shaker a 225 giri/min per 12-16 ore a 37 gradi Celsius.