JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 2:10 min. • November 28th, 2025
Inoculare una coltura contenente sia specie di Salmonella che non Salmonella in un mezzo di selenite cisticine, e incubare.
La selenite inibisce la crescita dei batteri sensibili al selenio interrompendo i loro processi metabolici.
Tuttavia, i batteri tolleranti al selenio, inclusa la Salmonella, possono metabolizzare la selenite e crescere.
Stendere la coltura su Xylose lisina desossicolato o agar XLD, e incubare.
La salmonella riduce il tiosolfato di sodio nell'agar XLD a idrogeno solfurato, che reagisce con ioni ferrici nel mezzo per formare solfuro di ferro nero, generando colonie con centri neri.
Al contrario, le specie non Salmonella che non producono idrogeno solfuro formano colonie senza centri neri, permettendo la differenziazione visiva dalla Salmonella.
Seleziona una colonia a centro nero e striscila sull'agar cromogenico Salmonella per una maggiore specificità.
L'agar cromogenico contiene substrati enzimatici specifici per Salmonella collegati ai cromofori.
Gli enzimi Salmonella tagliano questi substrati, rilasciando i cromofori e formando colonie pigmentate.
Seleziona queste colonie per ulteriori analisi.
Aggiungi 100 microlitri della coltura di pre-arricchimento a cinque millilitri di mezzo cristallitico di selenite. Poi, incubare la coltura a 36 gradi Celsius per 18-24 ore. Successivamente, raccogli un anello della coltura e spargilo su un piatto.
Poi, incubare la piastra a 36 gradi Celsius per 18-24 ore. Dopo l'incubazione, seleziona le colonie sospette e trasferiscile su una placca. Incubare la piastra a 36 gradi Celsius per 18-24 ore.