Screening dei batteri marini per l'isolamento di ceppi degradanti di inquinanti
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 4:04 min. • November 28th, 2025
Preleva un campione di acqua di mare contenente diversi microrganismi, inclusi batteri ambientali che degradano gli inquinanti.
Diluire serialmente il campione per ridurre la densità microbica e riporlo su un mezzo nutriente.
Dopo l'incubazione, selezionano colonie morfologicamente distinte, che possono ancora ospitare tipi batterici geneticamente e metabolicamente diversi.
Stria ogni colonia selezionata per disperdere le singole cellule e incubarle.
Ogni cellula forma una colonia, rappresentando un isolato batterico geneticamente puro con un profilo metabolico distinto.
Inoculare ogni isolato in un mezzo di crescita e incubare per aumentare la biomassa.
Centrifuga la coltura, scartare il surnatante e lavare con un tampone per rimuovere il residuo del substrato.
Risospendere le cellule nel tampone e inocularle in un mezzo di selezione contenente EE2, un inquinante ambientale.
Essendo l'unica fonte di carbonio nel mezzo, EE2 seleziona batteri che possono metabolizzarlo per energia e crescita.
La torbidità nel mezzo indica la crescita batterica, confermando l'isolamento batterico che degrada gli inquinanti.
Per selezionare i batteri, si effettuano prima diluizioni seriali fino a 10 fino al neg
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