Monitoraggio della crescita batterica a risoluzione di singola cellula in un sistema microfluidico

Inizia con un dispositivo microfluidico montato sul palco di un microscopio a fluorescenza rovesciata.

Il dispositivo è costituito da un chip polimerico dotato di canali di alimentazione orizzontali. Ogni canale è rivestito da una serie di strette trincee sigillate a un'estremità e progettate per confinare le cellule batteriche in catene lineari.

All'interno delle trincee si trovano cellule batteriche non mobili che esprimono una proteina fluorescente, permettendone la visualizzazione.

Ogni canale di alimentazione è collegato a pompe di siringa che forniscono un mezzo ricco di nutrienti a portata controllata.

Avviare il flusso per permettere al mezzo di diffondersi nelle trincee e favorire la crescita batterica.

Le cellule batteriche confinate si dividono all'interno della trincea, formando una catena di progenie.

Il design a trincea garantisce che le celle più recenti all'estremità aperta vengano lavate, consentendo il tracciamento a lungo termine delle celle più vecchie.

Acquisire immagini delle trincee nel tempo per monitorare la crescita e la divisione delle singole cellule batteriche.

Montare con cura il dispositivo caricato su un inserto da palco fissando con nastro il vetro di coper