Imaging della localizzazione batterica e dell'interazione ospite nel tessuto polmonare umano

Prendiamo una sospensione di Staphylococcus aureus marcata fluorescente e tessuto polmonare alveolare umano infettato dagli stessi batteri marcati con fluorescenza.

Inserire la punta distale della sonda microscopica a fluorescenza confocale fibrata nella sospensione batterica e scansionare.

I segnali fluorescenti luminosi confermano la marcatura della membrana batterica e la riuscita attivazione della sonda

Registra la fluorescenza mentre la sonda si muove nella sospensione.

Utilizzando un tessuto di pulizia del cristallino imbevuto di perossido di idrogeno, pulire la sonda per rimuovere i batteri residui e prevenire la fluorescenza di fondo

Porta la sonda pulita a contatto diretto con il tessuto e scansiona la superficie.

Nel tessuto, le fibre di collagene ed elastina appaiono come una matrice autofluorescente, mentre i batteri marcati con fluorescenze sono visibili come punti luminosi distinti.

Gli spazi alveolari, privi di fluorescenza, appaiono come regioni scure.

Registra un video per catturare sia i batteri aderenti ai tessuti sia quelli vagamente associati, consentendo la visualizzazione in tempo reale dell'infezione batterica nel tessuto polmonare alveolare dell'ospite.

Per iniziare la raccolta dati, clicca su start sullo schermo o premi il pedale sinistro per accendere il laser. Successivamente, immagini ciascuno dei campioni di sospensione batterica. Inserire l'estremità distale della fibra di imaging FCFM e muovere lentamente la fibra attraverso la sospensione per esaminare il campione.

Registra video di qualsiasi lunghezza premendo il pedale destro o selezionando i controlli di registrazione sullo schermo mentre la fibra si muove lentamente intorno al campione. Pulire l'estremità distale della fibra di imaging FCFM con perossido di idrogeno all'8% e i tessuti per la pulizia del cristallino tra i campioni. Per visualizzare ciascun campione di tessuto polmonare, inserire l'estremità distale della fibra di imaging FCFM nel campione, assicurandosi che si stabilisca un contatto diretto tra l'estremità della fibra e il tessuto.

Poi muovi delicatamente l'estremità della fibra di imaging per esaminare il campione. Allontanando l'estremità della fibra dal tessuto, il tessuto si allontanerà dal piano focale. Tuttavia, questo può essere utilizzato per visualizzare batteri etichettati che non sono attaccati al tessuto.

Registra video di qualsiasi lunghezza premendo il pedale destro o selezionando i controlli di registrazione sullo schermo mentre la fibra si muove lentamente intorno al campione.