Infezione orale di Drosophila melanogaster con batteri patogeni

Prendi una fiala con un coperchio che contiene agar nutritivo sovrapposto con carta filtrante.

Applica una sospensione di batteri patogeni sulla carta filtrante.

Inserisci una mosca di Drosophila melanogaster affamata nella fiala, poi posiziona il coperchio. Incuba per permettere l'alimentazione e garantire l'ingestione batterica.

I batteri ingeriti entrano nell'intestino e penetrano nella membrana protettiva che riveste il lume.

I batteri aderiscono all'epitelio sottostante, rilasciano tossine che favoriscono danni e invasioni epiteliali e colonizzano i tessuti interni.

Immergi la mosca nell'alcol per rimuovere i batteri associati alla superficie, poi risciacqua per rimuovere l'alcol.

Aggiungi un tampone e omogeneizza la mosca per liberare il contenuto batterico interno.

Eseguire diluizioni seriali dell'omogeneato in una micropiastra. Successivamente, piatta le diluizioni su agar nutritivo e incuba per permettere la formazione della colonia.

Contare le colonie per determinare il numero di cellule batteriche vitali derivanti da infezioni orali nella mosca.

Due o quattro ore prima dell'infezione orale, trasferire le mosche in fiale standard di agar senza cibo. Nel frattempo, per ogni mosca,