JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 2:24 min. • February 2nd, 2026
Si inizia con un topo anestetizzato che presenta due ferite cutanee essiccate a spessore intero sul dorso, con rimossi chirurgicamente sia lo strato epidermico che quello dermico.
Una medicazione trasparente a film copre le ferite per isolare il sito e prevenire contaminazioni esterne.
Permette al mouse di recuperare per un periodo definito.
Durante questo periodo, il sangue contenente componenti diversi entra nella ferita. Questo attiva le piastrine, innescendo l'assemblaggio di una matrice provvisoria composta da fibrina, fibronectina e proteoglicani, e avvia la formazione di coaguli di sangue.
Ri-anestesiare il topo e iniettare soluzione salina su ciascun fianco per mantenere l'idratazione.
Successivamente, iniettare una dose definita di un ceppo luminescente di Pseudomonas aeruginosa attraverso il film in ciascuna ferita.
I batteri si depositano all'interno della matrice provvisoria, che ne sostiene l'attacco e la crescita.
Insieme, la matrice e la fasciatura del film forniscono un ambiente favorevole alla formazione di biofilm, causando un'infezione cronica localizzata.
Registra la luminescenza per monitorare l'infezione batterica.
24 ore dopo l'intervento, pesare nuovamente il topo rianestetizzato e iniettare l'animale sottocutaneamente con 250 microlitri di cloruro di sodio sterile preriscaldato allo 0,9% su entrambi i fianchi.
Successivamente, carica 100 microlitri della sospensione luminosa P. aeruginosa in una siringa di sicurezza per tubercolina da 500 microlitri dotata di ago calibro 27 e inietta 40 microlitri di sospensione batterica attraverso la fasciatura trasparente in ogni ferita.
Assicurati che la sospensione batterica sia ben miscelata e che la medicazione trasparente sia intatta. Assicurati di perforare la medicazione trasparente solo una volta con l'ago, con il lato bisellato verso l'alto.
Poi riporta il topo nella gabbia su una borsa riscaldante con monitoraggio e aggiungi una pasta nutrizionale ad alto contenuto calorico inserita tra i pellet alimentari sul pavimento della gabbia.