JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 4:46 min. • January 30th, 2026
Prendere una sezione gengivale del topo infettata da batteri patogeni, pretrattata per accedere al DNA batterico.
Applica un tampone con una sonda a DNA marcata con digossigenina che prende di mira il DNA batterico.
Inserisci una copertura e sigilla per evitare la disidratazione del campione.
Introdurre calore per denaturare il DNA, poi incubare in condizioni calde e umide per permettere l'ibridazione della sonda.
Raffreddare il carrello e rimuovere il copertino, poi lavare più volte con un tampone per rimuovere le sonde non vincolate.
Aggiungi una soluzione bloccante per prevenire il legame non specifico degli anticorpi.
Incubare con anticorpi coniugati con enzimi che si legano alla digoxigenina.
Lava per rimuovere gli anticorpi non legati.
Aggiungere un inibitore per inattivare selettivamente l'enzima endogeno.
Applica un substrato che reagisca con l'enzima per ottenere un precipitato colorato.
Risciacquo con acqua per rimuovere il substrato in eccesso.
Aggiungi un colorante per colorare i nuclei.
Lava per rimuovere il colorante in eccesso.
Disidrata con etanolo e tratta con xilene per aumentare la trasparenza tissutale.
Montate la sezione.
Al microscopio, visualizza i batteri all'interno della
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