Rilevamento dei metaboliti fecali umani tramite un biosensore batterico

Si inizia con una coltura di biosensori batterici sospesa in un mezzo.

Questi batteri ingegnerizzati producono un fattore di trascrizione che, unendosi a uno specifico metabolita fecale, attiva un promotore associato a un gene reporter fluorescente.

A questa coltura, aggiungi un campione di feci umane filtrato contenente metaboliti, come il lattato, coinvolti nelle interazioni ospite-microbioma.

Diluire questa miscela con un mezzo fresco per mantenere un volume di reazione ottimale.

Incubare senza tremare per imitare l'ambiente intestinale umano.

I metaboliti fecali diffondono nella cellula batterica e si legano al fattore di trascrizione.

Questo complesso si lega al promotore e porta all'espressione genica del reporter e alla produzione di proteine.

Mescola la soluzione per una distribuzione uniforme, diluisci in un tampone e analizzala usando la citometria a flusso.

Mentre le cellule batteriche attraversano un laser, la fluorescenza emessa dalle proteine reporter conferma la presenza dello specifico metabolita fecale.