Valutazione della formazione di biofilm batterici utilizzando un saggio a base di colorante cationico

Inizia con una sospensione batterica in mezzo nutritivo.

Aggiungi la sospensione a una piastra multi-pozzetti e incuba.

I nutrienti presenti nel mezzo facilitano la crescita e l'attacco batterico.

I batteri aderiti secernono sostanze polimeriche extracellulari costituite da polisaccaridi, proteine e DNA per formare uno strato di biofilm.

Lava più volte con un tampone per rimuovere i batteri non legati.

Invertire la piastra per garantire la rimozione del liquido residuo dal pozzo e lasciare asciugare il biofilm.

Trattate con un fissativo per preservare le componenti cellulari del biofilm.

Aggiungi un colorante cationico che si lega ai componenti polimerici extracellulari carichi negativamente del biofilm.

Risciacquo con il tampone e ripeti più volte per rimuovere il colorante non legato.

Aggiungi un solvente per rilasciare il colorante legato al biofilm.

Utilizzando un lettore di lastre, misura l'intensità del colore del colorante rilasciato come lettura della formazione del biofilm da parte dei batteri.