Indagine dell'attività microbica intestinale umana sugli esosaccacaridi

Si inizia con il soprannatante prodotto dal microbiota intestinale umano durante la fermentazione in vitro degli esosaccacaridi. Il soprantantante contiene acidi grassi a catena corta deprotonati (SCFA) e altri metaboliti.

Aggiungi acido metafosforico per abbassare il pH del soprandanante e vortice per mescolare a fondo. Questo converte gli SCFA nelle loro forme protone, adatte all'analisi della cromatografia a gas.

Centrifuga per separare i detriti e raccogliere il sovrantantante contenente SCFA e altri metaboliti.

Filtrare il soprandanante per eliminare i residui e evitare interferenze con la cromatografia.

In un sistema di cromatografia gasso-cromatografia ad alte prestazioni, si inietta il soprantantante nell'ingresso riscaldato per vaporizzarlo. Poi, si mescola il vapore con un gas inerte e si fa passare attraverso una colonna di fase statica polare per la separazione.

Gli SCFA interagiscono con la fase stazionaria della colonna e si separano in base alla loro volatilità, con gli acidi a catena più corta che eluiscono prima di quelli più lunghi.

Identificare le concentrazioni dei diversi SCFA confrontando i risultati con gli standard interni. Questo riflette la degradazione microbic