JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 3:21 min. • February 26th, 2026
Inizia con una piastra di Petri contenente una co-cultura di Bdellovibrio bacteriovorus, un batterio predatore, e E. coli, la sua preda, sotto un cuscinetto di agarosio.
Il tappeto dell'agarosio mantiene E. coli immobilizzata, mentre B. bacteriovorus rimane mobile e invade attivamente le cellule prede.
Il predatore esprime un marcatore citoplasmatico rosso e un tag fluorescente verde fuso a una sottounità della DNA polimerasi per la visualizzazione.
Fissa il piatto in un supporto e applica olio a immersione sulla base del piatto e sull'obiettivo del microscopio per una risoluzione ottimale.
Monta il supporto sul microscopio e configuralo per il rilevamento della fluorescenza a doppio canale.
Usa ottica a campo chiaro per localizzare il piano focale e selezionare più campi di imaging non sovrapposti.
Imposta i parametri di time-lapse per catturare sia immagini in campo chiaro che fluorescenti in modo sequenziale a intervalli definiti.
Questo metodo consente di osservare la predazione iniziando con l'attacco e l'invasione della preda, seguita dalla trasformazione delle cellule prede, la crescita filamentosa, la septazione, la formazione della progenie e la conclusione con la lisi delle cell
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