Preparazione dell'inoculo di Gardnerella vaginalis per modellare infezioni urinarie ricorrenti nei topi

Fai un inventario di un ceppo resistente agli antibiotici di G. vaginalis, un batterio anaerobico associato a infezioni delle vie urinarie nei topi.

Durante un'infezione iniziale della vescica, E. coli uropatogeno stabilisce serbatoi quiescenti all'interno delle cellule epiteliali della vescica.

L'esposizione successiva a G. vaginalis provoca la sradicazione di cellule superficiali mediata da tossine, permettendo alla riemergenza dell'UPEC dormiente che causa recidiva di infezioni urinarie.

Per preparare l'inoculo di G. vaginalis , sfila il calcio su una piastra di agar nutritiva senza antibiotici per favorire il recupero batterico.

Incubare anaerobicamente per ottenere colonie in crescita attiva.

Trasferire un anello pieno di colonie dense in un brodo nutritivo privo di antibiotici.

Incubare staticamente in condizioni anaerobiche fino a raggiungere la concentrazione batterica desiderata.

Misura la densità ottica per stimare la concentrazione.

Trasferire la sospensione su un tubo, centrifugare per pelletare i batteri, scartare il surnadante e risospendere in un tampon.

Prepara diluizioni seriali e impiattale su substrati contenenti antibiotici per consentire la crescita selettiva di G. vagi