JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 3:16 min. • March 31st, 2026
Inizia con un topo co-infettato da un batterio patogeno e un virus.
Il virus danneggia il rivestimento epiteliale delle vie respiratorie superiori del topo, facilitando la diffusione dei batteri dal nasofaringe ai polmoni.
Inserire i polmoni di topo raccolti in una tetola contenente soluzione salina tamponata con fosfato, o PBS.
Trita i polmoni in piccoli pezzi e mescola bene.
Trasferire metà del tessuto polmonare in un tubo contenente PBS.
Inserire una sonda omogeneizzatrice del tessuto sterilizzato all'interno del tubo contenente il tessuto polmonare.
Omogeneizzare il tessuto per liberare i batteri nel PBS.
Diluire l'omogeneato e implattare le diluizioni su una piastra d'agar ricca di nutrienti.
Incubare la piastra per permettere la formazione delle colonie batteriche.
Contare queste colonie per quantificare il carico batterico polmonare, che riflette il carico batterico nei polmoni.
Per la raccolta polmonare, usando forbici dissecanti, taglia i lati della gabbia toracica esposta e tira delicatamente le costole verso la testa del topo per esporre il cuore. Inserisci un ago calibro 25 attaccato a una siringa da 10 millilitri pre-piena di PBS nel ventricolo destro e inizia a perfusere lentam
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