JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 3:47 min. • February 26th, 2026
Inizia con due micropiatti a fondo di vetro contenenti sospensioni di un batterio che forma biofilm.
La piastra di trattamento contiene un enzima attivo che disturba la segnalazione, mentre il controllo include l'enzima inattivato.
Copri i piatti e incuba per permettere l'adesione batterica alla superficie del micropiatto.
Lavare per rimuovere le cellule non aderenti, poi introdurre un nuovo substrato contenente enzimi e incubare.
Nel piatto di controllo, i batteri comunicano tramite molecole di segnalazione e producono sostanze polimeriche extracellulari (EPS), formando un biofilm.
L'enzima attivo degrada le molecole di segnalazione, compromettendone la funzione e riducendo la formazione di biofilm.
Rifornire con un mezzo fresco e incubare ulteriormente per rafforzare gli effetti di biofilm dell'enzima.
Rimuovere il mezzo, aggiungere lectine etichettate con fluorescenze e incubare per permettere il legame delle lectine all'EPS.
Lava per rimuovere eventuali lectine non legate.
Incubare con un fissativo per preservare l'architettura del biofilm, poi sciacquare il piatto.
Acquisire immagini di microscopia confocale per valutare la soppressione mediata dagli enzimi della formazione di biofilm.
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