JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 3:41 min. • February 26th, 2026
Prendi una sospensione di batteri patogeni.
Aggiungere la sospensione a una coltura aderente di macrofagi derivati dal midollo osseo o cellule BMDM e incubare.
I batteri utilizzano le proteine di superficie per legarsi ai recettori delle cellule ospiti, facilitando l'aderenza.
Risciacqua con un tampone per rimuovere i batteri non aderenti.
Aggiungi nuovi materiali e incuba.
I batteri aderiti vengono quindi interiorizzati dalla cellula ospite.
Aggiungi un antibiotico per eliminare i batteri non interiorizzati.
Scarta il supporto e lava con il tampone.
Aggiungi acqua fredda per lisare la cellula ospite, liberando contenuti cellulari, nucleo e batteri interiorizzati.
Raccogli il lisato cellulare e centrifuga per precipitare i detriti cellulari.
Raccogli il soprantantante contenente i batteri. Passala attraverso un dispositivo di filtrazione per catturare i batteri intatti.
Piega la carta filtro e mettila in un tubo.
Congelare rapidamente in azoto liquido per preservare l'integrità cellulare.
Conserva in condizioni di freddo per un uso successivo.
Utilizzando 0,5 millilitri della sospensione batterica lavata, infettare ogni piastra macrofagoica. Se si utilizzano più piatti, distanzia le infezioni di
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