Stabilire un modello murino delle infezioni da ustioni con batteri patogeni

Inizia con un topo anestetizzato con la schiena rasata.

Posiziona il topo con un coperchio in piastra di Petri posizionato sotto l'addome per mantenere la schiena orizzontale.

Immergi un blocco di ottone in un becher contenente acqua bollente finché non si riscalda.

Nel frattempo, somministra un analgesico tramite iniezione sottocutanea.

Poi, premi il blocco di ottone riscaldato sulla schiena rasata del topo.

Il calore danneggia lo strato più esterno della pelle, l'epidermide, e si diffonde ai tessuti sottostanti, creando una ferita da ustione.

Rimuovere il blocco e iniettare soluzione fisiologica sottocutanea per prevenire la disidratazione.

Successivamente, applica un inoculo di batteri patogeni sospesi in un tampon.

Usa un cotton fioc sterile per distribuire uniformemente i batteri sulla ferita.

I batteri si attaccano ai recettori cellulari tramite proteine superficiali, iniziano la colonizzazione, formano un biofilm protettivo e stabiliscono un'infezione localizzata.

Questo modello murino di infezione da ustioni è pronto per studi di interazione ospite-patogeno.

Dopo aver anestetizzato un topo, secondo il protocollo testuale, usa un tagliacapelli a 50 lame per radere il topo sulla schiena, esponendo quanta più pelle possibile. Poi, posiziona il coperchio di una piastra di Petri da 35 millimetri sotto l'addome del topo per mantenere la schiena in una posizione relativamente orizzontale.

Usa una piastra riscaldante da 10 pollici per 10 pollici e 220 VAC per far bollire l'acqua in un becher da 150 millilitri. Immergi un blocco di ottone nel becher fino a raggiungere l'equilibrio termico con l'acqua. Prima di creare la lesione da ustione, somministrare un'iniezione sottocutanea di analgesici preventivi per alleviare il dolore.

Dieci minuti dopo, indossando guanti termici, premi delicatamente il blocco di ottone riscaldato sulla zona rasata sul dorso del topo per sette secondi per indurre le ustioni. Somministrare 0,5 millilitri di soluzione salina sterile tramite iniezioni sottocutanee. Cinque minuti dopo l'induzione della lesione termica, si utilizza una pipetta per inoculare 50 microlitri di sospensione batterica contenente 5 volte 10 fino alla sesta CFU in PBS sulle ustioni del topo.

Poi, muovendo un cotton fioc sterile a zigzag sulla pelle, spalma l'aliquota sulle ustioni per distribuire le cellule batteriche nell'area bruciata nel modo più uniforme possibile.