Formazione dei granuli da stress durante l'infezione da Shigella delle cellule epiteliali cancerose

Inizia con una piastra multi-pozzetto contenente cellule epiteliali cancerose aderenti su un copertore.

Aggiungi Shigella flexneri, un batterio patogeno.

Centrifuga la piastra per favorire il contatto batterico con le cellule, poi incuba.

Utilizzando un sistema specializzato di secrezione, Shigella inietta proteine di virulenza nelle cellule epiteliali.

Queste proteine della virulenza modulano il sistema di segnalazione epiteliale, facilitando l'assorbimento batterico.

All'interno delle cellule, i batteri continuano a secernere proteine della virulenza, che interrompono la traduzione cellulare e accumulano mRNA non tradola.

Le proteine di legame e segnalazione dell'RNA si aggregano con gli mRNA non tradotti, formando granuli citoplasmatici privi di membrana noti come granuli di stress.

Scarta il substrato e lava per rimuovere i batteri non attaccati.

Successivamente, aggiungi un substrato di coltura preriscaldato integrato con gentamicina per eliminare i batteri attaccati alla superficie.

Aggiungi un fissativo per preservare le strutture cellulari e i granuli di stress.

Elimina il fissativo e lava con una lieve scuotimento per rimuovere residui di fissativo.

Le cellule sono pronte per la colo