Visualizzazione microscopica delle microlesioni batteriche nel tessuto cardiaco del topo

L'infezione da Streptococcus pneumoniae può causare la formazione di microlesioni all'interno del tessuto cardiaco.

I batteri all'interno delle microlesioni producono tossine che inibiscono l'infiltrazione delle cellule immunitarie dell'ospite all'interno della microlesione.

Per visualizzare queste microlesioni, si prende un topo eutanasiato infetto da S. Pneumoniae.

Disinfetta la zona toracica con etanolo.

Fai un'incisione e trasetta il diaframma.

Poi taglia e solleva la gabbia toracica per esporre il cuore.

Taglia i vasi sanguigni collegati ed estrae il cuore.

Lava il cuore con un tampone per rimuovere il sangue residuo.

Poi, inserire il cuore in una cassetta per la raccolta del campione di tessuto e immergerla in una soluzione fissativa per fissare il tessuto cardiaco.

Ottieni una sezione coronale del cuore ed esegui colorazioni di ematossilina ed eosina per colorare i batteri.

Al microscopio, visualizza la microlesione contenente batteri colorati.

Raccogli il cuore. Immobilizza il topo eutanasiato in posizione supina su una piattaforma chirurgica, spruzza il torace con etanolo al 70% e asciuga con una battuta. Utilizzando forbici chirurgiche e pinzep, apri la cavità toracica, rimuovi la gabbia toracica e trasmetti il diaframma per esporre cuore e polmoni.

Poi, taglia i vasi sanguigni collegati al cuore e usa una pinza per estrarre delicatamente il cuore senza lividi. Risciacquare il cuore con PBS e inserirlo in una cassetta per la raccolta di campioni di tessuto. Poi trasferire le cassette in una soluzione di formalina tamponata al 10% e, il giorno successivo, inviare l'incorporazione della paraffina.

Nelle fasi iniziali, le lesioni cardiache possono essere identificate dal cambiamento del colore e, in alcuni casi, dalla presenza di cellule immunitarie. Nelle lesioni avanzate, le cellule immunitarie saranno assenti e al loro posto si trovano grandi lesioni simili a vascoli.