JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 2:33 min. • February 26th, 2026
Inizia con le lastre contenenti batteri attaccati alla superficie e batteri planctonici o liberi.
Aggiungi cellule di ameba a entrambi i campioni.
Posizionare un tampone di agarosio contenente Calcein-AM, un colorante permeabile alle cellule, su ciascun campione.
Rimuovere il liquido in eccesso, lasciarlo asciugare e incubare i piatti.
Nella placca con batteri attaccati alla superficie, il contatto superficiale regola al massimo i geni della virulenza, esprimendo tossine.
Queste tossine interrompono la membrana dell'ameba e ne cambiano la forma.
La membrana amebaica danneggiata permette a più calcina-AM di entrare nel citoplasma, dove le esterasi intracellulari li dividono nella calcina fluorescente, portandone l'accumulo.
Al contrario, i batteri planctonici, privi di contatto superficiale, rimangono non virulenti, lasciando intatte le membrane delle amebe. Questo riduce l'ingresso di Calcein-AM nell'ameba, limitando l'accumulo di calceina fluorescente.
Le ameba sane inghiottono anche i batteri non virulenti.
Al microscopio fluorescente, cellule di amebe luminose e arrotondate indicano un'interazione batterica virulente, mentre le ameba fioche e amorfe indicano un'interazione batterica non
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