JoVE Encyclopedia of Experiments
Microbiologia
0 visualizzazioni • 1:45 min • February 26th, 2026
Facciamo criosezioni tissutali dal ceco, una regione dell'intestino crasso. Una sezione è di un topo infettato solo da Clostridioides difficile. L'altra sezione è di un topo co-infetto da C. difficile ed Enterococcus faecalis.
Nel tessuto co-infetto, E. faecalis metabolizza l'arginina dell'ospite e rilascia ornitina. C. difficile assorbe questa ornitina, favorendo la produzione di tossine associate alla crescita e il danno ai tessuti.
Per analizzare questi campioni utilizzando l'imaging MALDI, applica uno strato uniforme di soluzione matriciale.
Carica i vetrini in uno spettrometro di massa MALDI, dove un laser scansiona il tessuto, ionizzando gli amminoacidi attraverso la matrice.
Carica i vetrini in uno spettrometro di massa MALDI, dove un laser scansiona il tessuto, ionizzando gli amminoacidi attraverso la matrice.
Gli ioni risultanti sono separati in base al loro rapporto massa/carica e rilevati dallo strumento per creare mappe spaziali della distribuzione degli amminoacidi.
Il tessuto co-infetto mostra livelli di arginina più bassi e ornitina più elevati rispetto al campione monoinfetto, il che supporta la patogenesi di C. difficile guidata dalla cooperazione microbica.
Eseguire l'applicazione della matrice MALDI e la spettrometria di massa di imaging MALDI come dimostrato in precedenza.
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