Preparazione delle colonie di biofilm batterici per l'analisi morfologica

0 visualizzazioni • 3:54 min. • February 26th, 2026

Inizia con colonie di biofilm batterici coltivate su una piastra di agar nutriente.

Questi biofilm consistono in una matrice extracellulare idrofobica che protegge i batteri incapsulati dalle risposte immunitarie dell'ospite.

Aggiungi un fissativo e ruota delicatamente la piastra finché il biofilm non inizia a galleggiare.

Sigilla la piastra e incuba con una lieve scuotimento per preservare la struttura del biofilm.

Rimuovi il fissativo, aggiungi il tampone e incuba per stabilizzare la struttura del biofilm.

Usando una pipetta Pasteur, stacca delicatamente la colonia dall'agar.

Aggiungi concentrazioni crescenti di etanolo per disidratare le colonie batteriche.

Trasferire una colonia galleggiante su una carta filtrante imbevuta di etanolo e asciugarla all'aria in una camera chiusa.

Montare colonie essiccate su un monello e ponte rivestiti con nastro di carbonio con nastro per evitare la carica indotta dal fascio di elettroni.

Successivamente, ricopri il biofilm con uno strato metallico conduttivo per migliorare il contrasto di immagini.

Il biofilm è ora pronto per l'analisi morfologica tramite microscopia elettronica.

Per iniziare la fissazione del campione, si prepara prima una soluzione fiss

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