Stabilimento di un modello murino di infezione da Clostridium difficile

Inizia con un topo pre-trattato con antibiotici per esaurire il microbiota intestinale.

Immobilizza delicatamente il topo in posizione verticale per allungare l'esofago.

Successivamente, si prende un ago gavage orale collegato a una siringa contenente un inoculo di spore derivate da Clostridium difficile, un patogeno batterico anaerobico.

Inserisci l'ago del gavage dal lato della bocca e avanzalo lentamente nell'esofago.

Quando l'ago raggiunge la metà dell'esofago, somministra lentamente l'inoculo e ritira delicatamente l'ago.

Le spore somministrate passano attraverso lo stomaco fino all'intestino tenue, dove i sali biliari innescano la germinazione nei batteri vegetativi di C. difficile .

Questi batteri migrano verso il colon anaerobico, dove l'esaurimento dei microbioti concorrenti permette l'adesione alle superfici epiteliali, la proliferazione e la formazione di colonie.

I batteri colonizzati rilasciano tossine che interrompono le giunzioni epiteliali e danneggiano la barriera intestinale. Questa interruzione della barriera favorisce la traslocazione batterica nei tessuti più profondi, stabilendo Clostridium difficile infection.

In un cappuccio a flusso laminare, prendi un topo soggetto e immobilizza la testa immobilizzando delicatamente l'animale con la pelle flaccida del collo e della schiena.

Usando l'indice e assicurandosi che l'animale non vocalizzi o mostri segni di disagio, immobilizza ulteriormente la testa dell'animale e allunga l'esofago. Mantieni il topo in posizione verticale e verticale e passa delicatamente l'ago gavage sul lato della bocca. Dirige l'ago della gavaga lungo il palato e avanzalo lentamente verso l'esofago.

Quando l'ago è circa a metà dell'esofago, inietta 25 microlitri di inoculo delle spore e poi preleva delicatamente l'ago. Riporta l'animale nella gabbia e osservalo per eventuali segni di tosse o difficoltà respiratoria che possano indicare una somministrazione accidentale della trachea.