JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 3:08 min. • March 31st, 2026
Si inizia con un topo il cui tratto gastrointestinale è colonizzato da Clostridium difficile, un patogeno batterico anaerobico che forma spore.
Immobilizza il topo e lascialo defecare naturalmente in un tubo sterile pre-pesato.
Determinare il peso netto del campione fecale sottraendo il peso del tubo vuoto dal peso totale per preparare le diluizioni appropriate.
Trasferire il campione in un ambiente anaerobico per preservare la vitalità del batterio sensibile all'ossigeno.
Aggiungi un buffer al campione e interrompilo meccanicamente per liberarne il contenuto in sospensione.
Incubare per permettere a detriti più grandi di depositarsi, trattenendo cellule batteriche e spore nel soprandante.
Eseguire diluizioni seriali del sovrantante nel buffer.
Impiattare le diluizioni su un mezzo selettivo e incubare in condizioni anaerobiche.
Il mezzo favorisce la germinazione delle spore e la crescita selettiva di Clostridium difficile mentre inibisce batteri concorrenti, risultando in colonie distinte.
Contare le colonie per quantificare il carico di Clostridium difficile nelle feci e valutare la colonizzazione gastrointestinale.
Per raccogliere campioni fecali dai topi per la valutazione, si trattiene p
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