Sviluppo di un modello di infezione larvale del pesce zebra utilizzando il microgaffe

Prendi una larva di pesce zebra anestetizzata nella scanalatura di una muffa di agarosio. La testa è posizionata verso l'alto in un angolo per consentire l'accesso intestinale durante l'iniezione.

Coprila con agarosio a bassa fusione, poi lascia che l'agarosio si solidifichi e immobilizzi la larva.

Prendi un ago per microiniezione contenente batteri patogeni sospesi in una soluzione di colorante tracciante.

Sotto uno stereomicroscopio, posiziona l'ago ad angolo e guida l'ago attraverso l'agarosio fino alla bocca larvale.

Avanzala attraverso il tubo del cibo fino all'intestino.

Inietta i batteri nel lumen intestinale e conferma la somministrazione usando il colorante tracciante. Questo metodo non invasivo, chiamato microgavage, imita la via naturale dell'infezione.

Ritira l'ago. Taglia l'agarosio e trasferisci la larva in un substrato fresco.

I batteri si replicano e rilasciano tossine che danneggiano l'epitelio intestinale, favorendo l'invasione batterica e la colonizzazione nei tessuti più profondi.

Il modello di infezione dei pesci zebra è pronto per l'analisi.

In una piastra di agarosio all'1,5% con scanalature, si applica una goccia dello 0,8% di agarosio a bassa fusione sulle larve di