JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 2:36 min. • March 31st, 2026
Prendi una sospensione di un batterio patogeno isolato da una pianta infetta.
Il genoma batterico contiene una fusione trascrizionale, in cui il promotore di un gene regolatore della virulenza guida anche l'espressione di un gene proteico fluorescente a valle e privo di promotore.
Durante l'infezione delle piante, l'attivazione del promotore innesca la produzione delle proteine regolatorie e fluorescenti.
La proteina regolatoria attiva i geni della virulenza, mentre la fluorescenza fornisce una lettura misurabile dell'attivazione della virulenza.
Centrifugare le celle, scartare il surnante, poi risospendere per ottenere una sospensione concentrata.
Posiziona una goccia su una copertura e sovrappone un tampone di agaroso per diffondere e immobilizzare le cellule.
Cattura un'immagine in campo chiaro per identificare tutte le cellule batteriche, poi un'immagine di fluorescenza per rilevare la fluorescenza di singola cellula.
Unisci entrambi per visualizzare differenze di intensità di fluorescenza, che rivelano sottopopolazioni con alta, bassa o nessuna espressione genica di virulenza.
Questa variazione fenotipica riflette una strategia adattativa che migliora la sopravvivenza batterica durant
Visualizza la trascrizione completa e accedi a migliaia di video scientifici