Visualizzazione di capsidi virali trattati termicamente mediante microscopia elettronica a trasmissione

Prendere i tubi contenenti i capside virali, che sono particelle simili a virus prive di materiale genetico.

Riscaldare i tubi a una temperatura costante per durate variabili.

Una durata di riscaldamento più breve sottopone lievemente a stress le proteine del capside, mentre un riscaldamento prolungato altera il capside e provoca aggregazione.

Raffreddare rapidamente i tubi per prevenire ulteriori cambiamenti strutturali.

Trasferire il liquido su un film di paraffina.

Posizionare una griglia per microscopia elettronica a trasmissione (TEM) sulla goccia. I capside si attaccano alla superficie della griglia.

Asciugare la griglia con un foglio di carta da filtro per rimuovere il liquido in eccesso.

Lavare con un tampone per rimuovere i capside debolmente associati, quindi asciugare nuovamente la griglia.

Immergere in acetato di uranile, un colorante a base di metalli pesanti che si lega alla superficie del capside, rendendoli più scuri in microscopia elettronica a trasmissione (TEM).

Asciugare la griglia e posizionarla su una piastra. Conservare la piastra in un essiccatore per rimuovere l'umidità.

Acquisire l'immagine della griglia mediante microscopia elettronica a trasmissione (TEM) per visu