Valutazione dell'inibizione della crescita batterica mediata da fagi mediante misurazioni della densità ottica

Iniziare con una piastra multipozzetta contenente una sospensione di fagi diluita in serie in un brodo ricco di nutrienti come trattamento e brodo privo di fagi come controllo.

Aggiungere E. coli in ciascun pozzetto. Utilizzando uno spettrofotometro, misurare la densità ottica (OD) di base per registrare la concentrazione batterica iniziale.

Successivamente, incubare la piastra per consentire la crescita batterica e l'infezione da fago.

Nel controllo, i batteri utilizzano i nutrienti e si proliferano, aumentando l'OD.

Nel trattamento, i fagi si legano ai recettori della superficie batterica e iniettano i loro genomi nel citoplasma.

Utilizzando il macchinario della cellula ospite, il genoma virale si replica e produce proteine virali, che si assemblano in nuove particelle virali. Queste particelle lisano la cellula, liberando i discendenti.

Misurare l'OD a intervalli per confrontare la crescita batterica.

I pozzetti di controllo mostrano un aumento progressivo dell'OD, mentre i pozzetti trattati con fagi mostrano valori di OD più bassi, con riduzioni maggiori a concentrazioni più elevate di fagi.

Questo aiuta a determinare la concentrazione di fagi necessaria per l'inibizione massima della