JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 3:09 min. • September 30th, 2026
Prendere corpi di insetti infetti dal virus sospesi in un buffer contenente un agente chelante.
Omogeneizzare per rompere i tessuti degli insetti e rilasciare i componenti intracellulari, inclusi le particelle virali e gli ioni metallici reattivi.
L'agente chelante si lega agli ioni metallici, impedendo la formazione di specie reattive dell'ossigeno e proteggendo le particelle virali dai danni ossidativi.
Ultracentrifugare per formare un pellet del virus e dei detriti insolubili, quindi eliminare il soprannatante.
Aggiungere un buffer contenente sali e detergente, quindi risospendere il pellet mediante pipettaggio ripetuto. Il detergente dissolve i detriti ricchi di lipidi per liberare le particelle virali associate.
Centrifugare per raccogliere i detriti insolubili. Raccogliere il soprannatante contenente le particelle virali.
Filtrare il soprannatante per rimuovere i detriti residui e raccogliere il filtrato contenente il virus.
Dializzare il filtrato in acqua a bassa temperatura per rimuovere il detergente in eccesso e i sali del tampone.
Sostituire l'acqua periodicamente fino a quando le particelle virali non precipitano. Il virus è pronto per ulteriori utilizzi.
Omogeneizzare i corpi i
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