JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 3:42 min. • September 30th, 2026
Iniziare con cellule di tipo epiteliale umano.
Il primo pozzetto contiene cellule non trasfettate, e il secondo pozzetto contiene cellule trasfettate con il mimico di microRNA.
Nelle cellule transfezionate, un filamento mimico del microRNA si lega a un complesso proteico formando un complesso di silenziamento indotto da RNA.
Rimuovere il mezzo e aggiungere la sospensione virale.
Incubare per consentire l'attacco virale.
Scartare il mezzo e aggiungere mezzo fresco, quindi incubare.
In cellule non trasfettate, il virus subisce un'endocitosi mediata da recettore ed entra nella cellula.
Rilascia il genoma virale che si replica e produce numerose particelle virali.
Nelle cellule trasfettate, il complesso di silenziamento indotto da RNA riconosce il genoma virale, innescandone la degradazione e riducendo la produzione del virus.
Vengono rilasciati nuovi virus. Trasferire il mezzo contenente il virus.
Centrifugare per formare un pellet dei detriti e raccogliere i supernatanti contenenti il virus.
Aggiungere il surnatante a cellule non trasfettate. Incubare per l'infezione virale.
Le pozzette trattate con supernatante di cellule non trasfettate mostrano una maggiore morte cellulare, rispetto alle pozz
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