JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 3:39 min. • September 30th, 2026
Iniziare con una sospensione di liposomi che incapsulano un plasmide dell'antigenoma del virus del morbillo ricombinante e plasmidi ausiliari che codificano per proteine virali essenziali.
Il plasmide dell'antigenoma contiene il cDNA del genoma del morbillo, modificato per esprimere proteine immunostimolatorie e un reporter fluorescente nelle cellule infette.
Prendere una coltura cellulare produttrice di virus contenente antibiotici per prevenire contaminazioni.
Introdurre la sospensione di liposomi nella coltura e incubare.
Le liposomi si fondono con la membrana cellulare per consegnare i plasmidi.
Il macchinario della cellula ospite trascrive il cDNA dell'antigenoma in RNA e i plasmidi ausiliari in mRNA, consentendo l'espressione proteica e la formazione del complesso di replicazione virale. Questo complesso produce RNA genomico, che permette l'espressione delle proteine virali.
L'RNA genomico si assembla con le proteine virali per generare particelle virali ricombinanti.
Le cellule infette esprimono anche la proteina reporter fluorescente per la visualizzazione al microscopio e producono la proteina immunostimolante codificata dal virus.
Le cellule infette formano sincizi multinucleati,
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