JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 3:01 min. • September 30th, 2026
Iniziare con un pozzetto di prova contenente cellule tumorali geneticamente modificate che esprimono un antigene bersaglio, e un pozzetto di controllo con cellule tumorali prive dell'antigene.
Prendere un immunomodulatore biespecifico per linfociti T (BTE) codificato da un transgene virale, con due siti di legame, uno per l'antigene bersaglio e un altro per un recettore specifico per linfociti T.
Aggiungere il BTE e le cellule T nei pozzetti e incubare.
Nel campione in esame, il BTE collega la cellula tumorale e la cellula T, attivando la cellula T a rilasciare granuli citolitici.
Questo lisa la cellula tumorale, rilasciando un enzima intracellulare.
Nel controllo, il BTE si lega solo alla cellula T, evitando la lisi delle cellule tumorali.
Centrifugare e raccogliere il sopranatante.
Aggiungere un substrato e incubare.
L'enzima catalizza il substrato in un prodotto di colore rosso.
Aggiungere una soluzione di arresto e misurare l'intensità del colore.
Un'intensità maggiore nel campione in esame conferma l'attività immunomodulatrice specifica per il bersaglio del BTE.
Per iniziare la valutazione della citotossicità mediata da cellule indotta da BTE mediante il rilascio di LDH, isolare innanzit
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