Infezione intranasale da Herpesvirus murino nel topo per la valutazione delle risposte immunitarie dell'ospite

Iniziare con un topo sano e anestetizzato posizionato per la somministrazione respiratoria.

Somministrare il virus dell'herpes murino per via intranasale per avviare l'infezione.

Il virus viaggia attraverso le vie aeree e raggiunge i polmoni.

All'interno dei polmoni, il virus infetta le cellule epiteliali polmonari e rilascia il suo nucleocapside.

Il genoma virale entra nel nucleo e viene trascritto in RNA virale.

Un sensore citosolico dell'ospite riconosce l'RNA virale e inizia vie di segnalazione che attivano specifici fattori di trascrizione. Questi fattori successivamente promuovono l'espressione dei geni delle citochine, portando alla produzione di citochine antivirali.

Dopo l'infezione, dissezionare il topo eutanasizzato e prelevare il tessuto polmonare.

Posizionare un lobo polmonare in un tubo contenente palline di silice e aggiungere mezzo di coltura freddo.

Omogeneizzare il tessuto per rompere le cellule e rilasciare i componenti intracellulari, inclusi i citochine antivirali.

Raffreddare l'omogenato sul ghiaccio, quindi ripetere l'omogeneizzazione per assicurare una completa rottura del tessuto.

Centrifugare per ottenere un pellet dei detriti cellulari.

Raccogliere il surnatante con