JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 4:05 min. • September 30th, 2026
All'interno di un armadio di contenimento biologico, aspirare una sospensione virale altamente contagiosa in una capsula contenente griglie per microscopia elettronica a trasmissione (TEM).
Incubare in posizione orizzontale per favorire l'adesione uniforme dei virus sulla griglia.
Rimuovere la sospensione con i virus non legati, quindi aggiungere un fissativo per cross-linkare le proteine, preservando la struttura virale e riducendo la infettività.
Dopo l'incubazione, lavare per rimuovere il fissativo residuo.
Aggiungere un colorante negativo denso agli elettroni, che si lega alle griglie circostanti il virus e migliora il contrasto durante l'acquisizione delle immagini.
Rimuovere la pipetta e asciugare le griglie per eliminare l'eccesso di colorante.
Posizionare la capsula in un tubo da centrifuga contenente carta filtrante imbevuta di tetrossido di osmio, quindi sigillare il tubo e incubare per la fissazione mediante vapore.
L'osmio tetroxido stabilizza la struttura della membrana lipidica, migliora il contrasto dell'immagine e inattiva completamente il virus, consentendo un trasferimento sicuro all'esterno del biocontainment.
All'interno di una struttura per microscopia elettronica a tr
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