JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 2:41 min. • September 30th, 2026
Prendere una sospensione di particelle virali mescolata con detriti cellulari dell'ospite.
Centrifugare per formare un pellet dei detriti più grandi. Raccogliere il soprannatante, che contiene le particelle virali insieme ai detriti più piccoli.
Filtrare il sopranatante per rimuovere i residui più piccoli rimanenti.
Aggiungere una soluzione salina contenente polietilene glicole, o PEG, al filtrato. Invertire il tubo per mescolare e incubare.
Il PEG agisce come un agente di affollamento molecolare che avvicina le particelle virali, favorendone la precipitazione.
Contemporaneamente, il sale potenzia questo effetto neutralizzando la repulsione elettrostatica tra le particelle virali, consentendo loro di aggregarsi.
Centrifugare il tubo per formare il pellet degli aggregati virali. Scartare il surnatante ricco di PEG.
Ripetere la centrifugazione e scartare qualsiasi residuo di supernatante.
Aggiungere un buffer e incubare sotto agitazione per risospendere il pellet.
Aliquotare la sospensione contenente le particelle virali e conservarla a una temperatura ultra-bassa per preservare l'integrità strutturale e l'infettività virale.
Centrifugare il surnatante virale a 2000 ×g per 10 minuti. Successiv
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