Derivazione di podociti renali umani da cellule staminali pluripotenti indotte: una procedura per la differenziazione diretta di podociti renali maturi da cellule staminali

Le cellule mature possono essere riprogrammate per riacquistare il loro stato indifferenziato e proliferativo simile a quello delle cellule staminali. Queste cellule riprogrammate sono chiamate cellule staminali pluripotenti indotte o IPSC. Per differenziare le cellule pluripotenti in cellule specializzate nei podociti coinvolte nella filtrazione dei rifiuti dai reni, iniziare assumendo una sospensione di IPSC umane in un mezzo di induzione del mesoderma.

Trasferire questa sospensione su una piastra di coltura rivestita di matrice basale e incubare. La matrice basale facilita l'adesione delle IPSC alla base. Successivamente, i fattori specifici presenti nei terreni inducono la differenziazione delle IPSC nelle cellule del mesoderma, le cellule precursori dei podociti. Aspirare il fluido esaurito.

Integrare la piastra con il volume desiderato di un mezzo intermedio di induzione del mesoderma e incubare per un periodo prolungato. Questo passaggio porta alla differenziazione delle cellule mesodermiche in podociti immaturi. Sostituire il mezzo intermedio di induzione del mesoderma con una soluzione di tripsina per dissociare le cellule aderenti dalla piastra.

Successivamente, centrifug