Isolamento delle cellule muscolari lisce del detrusore: una procedura di digestione enzimatica per ottenere cellule DSM da campioni di vescica urinaria umana

Le cellule della muscolatura liscia detrusoria, o DSM, presenti all'interno della parete della vescica urinaria costituiscono l'unità funzionale primaria della vescica. Queste cellule si rilassano per facilitare l'immagazzinamento dell'urina nella vescica e si contraggono per rilasciare l'urina.

Per isolare le cellule DSM, inizia prelevando un campione di vescica urinaria umana prelevato. Lavare il campione per rimuovere eventuali tracce di sangue e detriti. Successivamente, fissare il tessuto con la superficie mucosa rivolta verso l'alto. Asportare il grasso, i vasi sanguigni e lo strato mucoso per esporre lo strato muscolare detrusore sottostante. Quindi, tagliare il tessuto privo di mucosa in piccoli frammenti.

Trattare i frammenti di tessuto con un cocktail digestivo contenente papaina e incubare. La papaina, un enzima proteolitico, promuove la digestione delle proteine nella matrice extracellulare che tengono insieme le cellule e avvia l'allentamento delle cellule nella matrice. Ora, rimuovi il surnatante contenente papaina.

Aggiungere la sospensione dell'enzima collagenasi ai frammenti di tessuto e incubare a temperatura fisiologica. La collagenasi rompe la matrice extracellu