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0 visualizzazioni • 2:42 min. • April 30th, 2023
Gli sferoidi tumorali sono aggregati cellulari tridimensionali di cellule tumorali. Questi sferoidi possono essere incorporati nella matrice di collagene, con conseguente formazione di blocchi sferoidi. Per congelare un blocco sferoide, inizia posizionando un blocco sferoidale in gel di collagene al centro di uno stampo istologico.
Sciacquare il blocco con un tampone adatto e integrare lo stampo con una soluzione fissativa. Incubare per consentire a questa soluzione di penetrare negli sferoidi e reticolare le proteine cellulari. Questo passaggio aiuta a mantenere la struttura sferoidale per la procedura successiva. Quindi, aspirare la soluzione fissativa.
Posizionare il blocco di gel sferoidale in uno stampo istologico fresco contenente un sottile strato di terreno di inclusione. Sovrapponilo con più mezzo di incorporamento per immergere completamente il blocco sferoide. Infine, immergere lo stampo in un bagno di azoto liquido per un breve periodo.
Il congelamento rapido impedisce la formazione di cristalli di ghiaccio più grandi all'interno degli sferoidi. Aiuta a mantenere l'integrità degli sferoidi senza causare danni meccanici. Una volta che lo strato medio di incorporamento si
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