JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Ricerca sul cancro
0 visualizzazioni • 3:04 min. • April 30th, 2023
Gli esosomi - vescicole di membrana di dimensioni nanometriche derivate da cellule - mostrano il potenziale come veicoli di somministrazione terapeutica per piccoli RNA interferenti a doppio filamento o siRNA.
Dopo il rilascio nel citoplasma della cellula bersaglio, il siRNA si lega al complesso di silenziamento indotto dall'RNA. Il complesso attivato quindi riconosce e si lega a mRNA specifico, regolandone negativamente l'espressione e mediando il silenziamento genico.
Per incapsulare il siRNA negli esosomi, per prima cosa, raffreddare una cuvetta di elettroporazione sul ghiaccio. Successivamente, mescolare gli esosomi e il siRNA specifico in una provetta nel rapporto desiderato utilizzando un tampone di elettroporazione adatto. A questo punto, trasferite il composto nella cuvetta pre-raffreddata.
Chiudere la cuvetta e posizionarla nel supporto della cuvetta dell'elettroportatore. Ruotare la rotella girevole per assicurarsi che la cuvetta entri in contatto con gli elettrodi di elettroporazione. Ora, esegui il programma di elettroporazione selezionato.
Durante l'elettroporazione, gli impulsi elettrici disturbano il doppio strato fosfolipidico degli esosomi sospesi nel tampone condu
Visualizza la trascrizione completa e accedi a migliaia di video scientifici