Iniezione idrodinamica della pelvi renale: una tecnica per fornire direttamente il DNA nelle cellule renali del modello murino

Per fornire il DNA plasmidico direttamente nelle cellule renali del topo, iniziare posizionando un topo anestetizzato in posizione laterale. Prepara il topo rimuovendo la pelliccia dorsale dal lato. Individuare un sito di incisione appropriato nel fianco sinistro, sotto la gabbia toracica.

Fai una piccola fessura nella pelle e negli strati muscolari sottostanti. Quindi, applicare una leggera pressione sulla cavità addominale per esporre il rene attraverso il sito dell'incisione. Rimuovere parzialmente il tessuto adiposo perinefrico sovrapposto per visualizzare la pelvi renale.

Ora, prendete una siringa contenente DNA plasmidico in un tampone di consegna idrodinamico. Inserire l'ago direttamente nella pelvi renale, una porzione triangolare e dilatata dell'uretere nel rene. Iniettare rapidamente la soluzione plasmidica in modo che il DNA raggiunga direttamente il parenchima renale, la parte funzionale del rene che filtra il sangue.

L'erogazione rapida di un grande volume di fluido attraverso la pelvi renale crea un'alta pressione, creando pori transitori nella membrana plasmatica delle cellule parenchimali renali. Questo facilita l'ingresso dei plasmidi nelle cellule. Alla fine, ques