Patologia di espansione: un metodo per l'imaging ottico ad alta risoluzione di campioni di tessuto clinico
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0 visualizzazioni • 4:14 min. • April 30th, 2023
La patologia di espansione, o ExPath, è una tecnica di preparazione del campione per campioni biologici, che consente alla microscopia ottica convenzionale di visualizzare strutture su scala nanometrica espandendole utilizzando un sistema polimerico.
Innanzitutto, prelevare un vetrino di campione di tessuto immunocolorato processato e coprirlo con una soluzione di ancoraggio contenente sia gruppi proteici che polimero-reattivi. Il gruppo proteino-reattivo del reagente di ancoraggio si lega alle ammine delle biomolecole all'interno delle cellule.
Successivamente, aggiungere una soluzione gelificante adatta sul campione e incubare per consentirne la diffusione all'interno del tessuto. Il gruppo polimero-reattivo del reagente di ancoraggio si lega ai monomeri liberi all'interno della soluzione gelificante, consentendo alle biomolecole di ancorarsi al polimero durante la polimerizzazione.
Una volta completata la polimerizzazione del campione, coprire il vetrino con una soluzione di proteinasi. Le proteinasi digeriscono le proteine del citoscheletro per rimuovere qualsiasi resistenza strutturale, consentendo alle cellule di espandersi senza rompersi. Dopo la digestione enzimatica, il ca
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