Aspirazione di liquidi da glomeruli di topo: un metodo per aspirare il liquido glomerulare dal topo utilizzando la micropuntura mediata da due fotoni

0 visualizzazioni • 6:43 min. • April 30th, 2023

Nel rene, il glomerulo - un fascio di piccoli vasi sanguigni racchiusi nella capsula di Bowman - avvia la filtrazione del sangue ed espelle il fluido di scarto nello spazio circostante di Bowman. L'indagine sul contenuto del liquido glomerulare aiuta a comprendere la fisiologia renale.

Per aspirare il liquido glomerulare, preparare un topo anestetizzato con il rene esteriorizzato chirurgicamente. Ora, iniettare il colorante fluorescente destrano nei vasi sanguigni dietro l'orbita dell'occhio del topo. Le molecole di destrano fluorescente si muovono attraverso il flusso sanguigno e raggiungono il rene.

A causa dell'alto peso molecolare del destrano, il colorante fluorescente viene trattenuto all'interno del glomerulo, conferendogli un colore verde. Sotto un microscopio a due fotoni, che consente la visualizzazione di strutture profondamente posizionate, individuare un glomerulo adatto per ottenere un accesso adeguato al fluido glomerulare.

Quindi, allineare una punta per micropipetta rivestita di nanoparticelle fluorescenti rosse con l'asse laterale del rene. Utilizzando un micromanipolatore, far avanzare la punta della pipetta per penetrare nel rene. Quando la punta raggiunge il gl

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