Saggio di germinazione di perline per la valutazione dell'angiogenesi in fase iniziale: un modello in vitro basato su perline per studiare la germinazione endoteliale in presenza di periciti

L'angiogenesi è la formazione di nuovi vasi sanguigni dai vasi sanguigni esistenti durante le condizioni di sviluppo e patologiche. Un'ampia comunicazione tra le cellule endoteliali che rivestono la superficie interna dei vasi sanguigni e i periciti circostanti - cellule di supporto sul lato esterno dei vasi sanguigni - è fondamentale per l'angiogenesi.

Per studiare l'angiogenesi in vitro, iniziare con cellule endoteliali e microsfere portanti rivestite di periciti sospese in una soluzione di fibrinogeno, una glicoproteina solubile che agisce come precursore della fibrina.

Ora, pipettare la sospensione di perle in una piastra di coltura contenente una soluzione di trombina, un enzima proteolitico, e incubare. La trombina si lega alla molecola di fibrinogeno, provocando la sua scissione per formare monomeri di fibrina insolubili, formando gel polimerico di fibrina. Questa fase garantisce l'inclusione di perle rivestite di cellule nel gel di fibrina.

Successivamente, piastra una coltura di fibroblasti - cellule precursori del tessuto connettivo - sopra il gel di fibrina e incuba per consentire l'attivazione dei fibroblasti.

Durante l'incubazione, i fibroblasti secernono fattori cruci