Saggio di colorazione nucleare differenziale: un test per determinare la citotossicità del mitocan mediante ioduro di propidio e doppia colorazione di Hoechst

I mitocani sono una classe di farmaci che influenzano selettivamente il funzionamento dei mitocondri nelle cellule tumorali e inducono l'apoptosi.

Per determinare la citotossicità del mitocan, seminare una sospensione cellulare contenente cellule tumorali semiaderenti su una piastra a più pozzetti. Trattare la piastra con la soluzione di mitocan desiderata e incubare.

Il mitocan entra nella cellula tumorale per interromperne l'attività mitocondriale, portando infine alla morte cellulare nelle cellule tumorali sensibili al mitocan. Trattare le cellule con una soluzione colorante contenente una miscela di colorante Hoechst e ioduro di propidio.

Hoechst, un colorante fluorescente permeabile alla membrana, penetra in tutte le cellule e si lega alla regione ricca di AT del loro DNA, conferendo una fluorescenza blu ai nuclei di cellule vive e morte.

Al contrario, lo ioduro di propidio, un colorante fluorescente impermeabile alla membrana, entra esclusivamente nelle cellule morte attraverso le parti danneggiate delle loro membrane. Il colorante si intercala tra le basi del DNA, conferendo un'ulteriore fluorescenza rossa alle cellule morte. La presenza di entrambi i coloranti nei nuclei di