Misurazione della contrazione di SMC in vitro: un metodo non invasivo per valutare la contrazione delle cellule muscolari lisce utilizzando il rilevamento dell'impedenza elettrica cellula-substrato

La parete dell'aorta ha prevalentemente cellule muscolari lisce, o SMC, contenenti macchinari proteici contrattili che si contraggono e si rilassano per regolare il flusso sanguigno aortico.

Per misurare la risposta contrattile delle SMC aortiche in vitro, ottenere una piastra multipozzetto contenente un array di sensori di rilevamento dell'impedenza cellula-substrato elettrico, o ECIS. Ogni array contiene elettrodi a film d'oro sul fondo del pozzetto, delineati con una pellicola isolante. Ricoprire i pozzetti con la gelatina.

Seminare la sospensione primaria di SMC umana nei pozzi. Trasferire la piastra a pozzetti contenente ECIS in un supporto per piastre collegato a un amplificatore e a un sistema di acquisizione dati, garantendo il contatto dell'elettrodo con il supporto. Applicare una piccola corrente alternata costante tra gli elettrodi per misurare il potenziale attraverso di essi.

Durante l'incubazione, le SMC aderiscono e si diffondono sul rivestimento di gelatina. Le celle si comportano come isolanti, limitando il flusso di corrente tra gli elettrodi. Man mano che più celle si attaccano alla superficie, il flusso di corrente diminuisce ulteriormente. Di conseguenza, l'imp