Saggio di rilascio dell'enzima mediatore umanizzato: un metodo immunochimico per lo screening del potenziale allergico dell'antigene del test monitorando la risposta alla degranulazione dei basofili in vitro

Quando esposte a un allergene - antigene non patogeno - le cellule presentanti l'antigene elaborano e presentano l'allergene ai linfociti T helper di tipo 2. Questi linfociti T innescano la differenziazione dei linfociti B in plasmacellule e producono immunoglobuline E, IgE, anticorpi che si legano ai recettori FC IgE specifici ad alta affinità sulla superficie dei basofili circolanti, cellule secretorie contenenti granuli.

Dopo la successiva esposizione all'allergene, i complessi IgE-Fc riconoscono e si legano all'allergene, attivando i basofili per rilasciare granuli comprendenti mediatori come citochine ed enzimi lisosomiali tra cui la β-esosaminidasi, evocando una potente risposta infiammatoria.

Per esaminare il potenziale allergico di un antigene del test in vitro, iniziare con una sospensione di basofili cancerosi di ratto trasdotti che esprimono recettori FC IgE specifici per l'uomo. Trattare con siero umano contenente IgE da un donatore allergico. Gli anticorpi IgE si legano e sensibilizzano i recettori Fc basofili.

Successivamente, aggiungere un tampone e un volume adeguato di antigene del test ai basofili sensibilizzati. L'antigene, a seconda della sua affinità per le IgE